Preparación buffer fosfatos (0.1 M pH 7.2)

Descripción

El buffer de fosfatos es altamente soluble en agua y tiene una alta capacidad de amortiguación, pero inhibirá la actividad enzimática y precipitará en etanol. Es uno de los más empleados en biología celular y molecular, en química, ciencia de materiales entre otros 

Reactivos

Fosfato de sodio dibásico heptahidratado (Na2HPO4•7H2O) 

Fosfato de sodio monobásico anhidro (NaH2PO4)

Equipo

Vasos de precipitado

Probetas

Plato caliente/termoagitador (opcional)

Balanza

Espátulas

Agitador

Platillos de pesaje

Metodología

1. Preparar un stock de sodio fosfato dibasico (0.5 M), disolviendo 35.5 g de sodio fosfato dibásico en un volumen final de 500 mL de H2O (puede ocurrir cristalización si se almacena a 4°C, agitar en tibio en un plato caliente para deshacer los cristales)
2. Preparar stock de sodio fosfato monobásico (0.5M), disolviendo 30 g de sodio fosfato monobásico anhidro en un volumen final de 500 mL de H2O
3. Preparar 0.1 M sodio fosfato dibásico: Agregue 80 mL de stock de sodio fosfato dibasico 0.5 M del paso 1 a un vaso de precipitado y ajuste a un volumen final de 400 mL de H2O.
4. Preparar 0.1 M sodio fosfato monobásico: Agregue 30 mL de stock de sodio fosfato dibasico 0.5 M del paso 2 a un vaso de precipitado y ajuste a un volumen final de 150 mL de H2O.
5. Lleve la solución de 0.1 M sodio fosfato monobásico del paso 3 a un pH de 7.2 añadiendo 0.1 M sodio fosfato monobásico del paso 4 tanto como se necesite.